FACS Core Facility
Core-Facility für Durchflusszytometrie im „Zentrum für Infektionsmedizin“
Die zentrale Einrichtung Durchflusszytometrie (FACS Core Facility, FCF) ermöglicht institutsübergreifend allen Wissenschaftlern der Freien Universität Zugriff auf etablierte und innovative Methoden und Instrumente der Zellsortierung für ihre jeweiligen wissenschaftlichen Fragestellungen.
- BD FACS ARIA III Zellsorter
- BD FACS Canto II Analyzer
Laser-Filter-Kombinationen: Ausstattung |
- Analysen und Sortierungen von Zellen verschiedener Spezies und Gewebe
(z. B. Maus, Mensch, Schwein, Hund, bzw. Blut, Darm, Haut) - Standardzellanalysen und -sortierungen
(z. B. Lymphozyten, DCs, Zellinien, Transfektanten) - Sortierung infektiöser Proben (S2); der Core Facility bleibt es vorbehalten Aufträge aufgrund einer potentiellen gesundheitlichen Gefährdung des Personals abzulehnen
Wir bieten Operator-gestützte Zellsortierung am FACS ARIA III sowie eigenständige Zellanalyse am FACS Canto II an.
Unser Analyzer FACS Canto II verfügt über 3 Laser (405 nm, 488 nm und 632 nm). Im Sorter FACS ARIA III stehen 4 Laser (405 nm, 488 nm, 561 nm und 632 nm) zur Verfügung.
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Nutzungsgebühr / h |
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Analysegerät (Canto II) |
25 € |
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Sortiergerät (ARIA III) |
70 € inkl. Operator |
Zur Zeit ist es ausschließlich Mitarbeitern von Institutionen der Freien Universität Berlin möglich die Core Facility zu nutzen.
Die Buchung der Termine für beide Geräte erfolgt über das OpenIRIS Buchungssystem der freien Universität Berlin:
https://fub.openiris.io/Buchungen oder Veränderungen eines Termins sind am selben Tag nicht mehr möglich. Es können keine Buchungen am Wochenende oder an Feiertagen in Berlin getätigt werden. Termine müssen mind. 24h im Voraus gecancelt werden, anderenfalls werden 2h Nutzungsgebühren berechnet.
Informationen zur Registrierung in OpenIRIS und zur Buchung über das System finden Sie als Download in englischer Sprache hier.
Vorbesprechung vor dem Projektstart
In einer Vorbesprechung werden zunächst die generellen Ziele des Projektes abgeklärt. An der Vorbesprechung nehmen der Auftraggeber sowie der Leiter und/oder der Operator der FCF teil. Bei Standardzellsortierungen genügt dazu oft eine Kontaktaufnahme per E-Mail oder Telefon.
Zur praktischen Durchführung jedes Sorts benötigt der Operator Informationen über den Zelltyp, die Zellzahl, die weitere Verwendung der Zellen nach dem Sort und die eingesetzten Fluorochrome, da dies Einfluss auf die Geräteeinstellung, die Wahl des Sort-Setups und die Dauer der Sortierung hat.
Zur Durchführung der Zellsortierungen müssen von den Auftraggebern Proben in geeigneter Weise präpariert werden. Die geeignete Art der Präparation erfolgt nach dem Protokoll bzw. nach Absprache mit der FACS Core Facility (FCF).
Die Proben müssen immer vorher filtriert werden, beim FACS ARIAIII entsprechend der Nozzlegröße. Dies wird bei der Vorbesprechung festgelegt.
Die Probenlösung darf kein Phenolrot enthalten, dies schädigt die Flowcell und führt zum kostenintensiven Austausch. Weitere schädigende und wenn möglich zu vermeidende Substanzen in der Probenlösung sind PI und DAPI.
Für innovative Anwendungen bietet die FCF Hilfestellung zur gemeinsamen Erarbeitung eines geeigneten Präparationsprotokolls.
Für die ersten Einstellungen am Sorter ist immer eine Negativkontrolle notwendig.
Die Zell-Sortierungen werden nach Terminvergabe im OpenIRIS-System mit dem Operator durchgeführt.
Eine selbständige Durchführung der Zellsortierungen durch Nutzer ohne Hilfe des Operators z. B. außerhalb der üblichen Dienstzeiten, ist aufgrund der wesentlich komplexeren technischen Abläufe von Zellsortierungen im Vergleich zu FACS-Analysen nicht möglich.
Am Analyzer kann selbständig, nach einer ausführlichen Einweisung durch das Personal der Core Facility, gearbeitet werden.
Alle Daten können, wenn vorhanden, auf dem Austauschlaufwerk des jeweiligen Institutes gespeichert werden. Hierfür ist der Zedat Account des Auftraggebers notwendig. Alternativ können die Daten kurzzeitig auf unserem Laufwerk gespeichert werden und an einem unserer Computer auf einen Datenträger übertragen werden. Externe Datenträger dürfen nicht an die FACS Geräte angeschlossen werden!
Die Daten, die mit dem Analyzer akquiriert werden, sind unverzüglich nach der Messung zu exportieren und von dem Gerätecomputer zu löschen!
Da es sich nicht um eine Permanentspeicherung handelt und um möglichem Datenverlust vorzubeugen, wird dringend geraten, die akquirierten Daten bereits direkt nach Erfassen abzuspeichern.